重组逆转录病毒介导的转蚓激酶基因兔

摘要：

目的 通过重组逆转录病毒介导获得转蚓激酶基因家兔.方法 将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清直接注射雄性兔的睾丸组织转染精原干细胞.结果 病毒上清经NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL.病毒注射3月龄兔睾丸组织,过1.5个月取其睾丸、肾、脾、肝、肺进行组织切片观察,结果正常.提取交配所得F0、F1代仔兔基因组,经PCR、Southern检测,转基因阳性率F0代为6.3%(2/32)、F1代为15.3%(2/13).结论 通过重组逆转录病毒直接注射3月龄兔睾丸组织可获得转基因兔,病毒对兔的脏器无损害.

关键词：蚓激酶、重组逆转录病毒、包装、转染、转基因

所属期刊栏目：15

分类号：S814.8(普通畜牧学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA206653

在线出版日期：2008-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：449-452,插5