10.3969/j.issn.1005-4847.2007.06.008
仙台病毒F基因的克隆及原核表达
目的 利用原核表达系统表达仙台病毒(Sendai Virus)F蛋白主要抗原片段FP(S),并对表达产物进行免疫学初步研究.方法 根据GenBank公布的仙台病毒F蛋白(gi:9627219)的基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR扩增出F基因的主要抗原片段FP(S),插入pMD-18-T载体中,鉴定正确后克隆入pQE31原核表达载体中,将鉴定正确的pQE31-FP(S)转化大肠埃希菌M15,IPTG诱导表达,对大肠埃希菌裂解物进行SDS-PAGE和Western-blot验证.结果 大肠埃希菌表达的FP(S)相对分子质量约26×103,与预期相符;能与SeV阳性血清发生特异性反应,出现单一条带.结论 原核表达的FP(S)蛋白有良好的抗原性,为检测仙台病毒抗体的ELISA检测方法的研究奠定了基础.
仙台病毒、F基因、克隆、诱导表达
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R373-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
上海市科技发展基金044909002
2008-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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