免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究

摘要：

目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法.方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty.结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0.5 μg/107 beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4 h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1 h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty.结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法.

关键词：免疫磁珠、泰泽氏病原体、血清学试验

所属期刊栏目：14

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2006-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：126-131