禽流感病毒H5N1亚型NS1基因在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,用于AIV感染与注射灭活疫苗鸡的鉴别诊断和NS1蛋白功能研究.方法采用RT-PCR方法对H5N1亚型AIV NS1基因进行扩增,将PCR产物克隆于pGEM-T-easy载体,将该基因插入pGEX-4T-1中构建NS1基因原核表达载体,转化BL21大肠杆菌后,在IPTG诱导下表达NS1蛋白,Western blot鉴定表达NS1蛋白.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NS1基因,其核苷酸序列长度为690 bp,编码230个氨基酸残基.构建NS1基因原核表达载体在大肠杆菌内表达出约51×103的NS1融合蛋白.Western blot鉴定表明:表达NS1蛋白与H7N2 AIV感染鸡血清有反应性.结论在大肠杆菌中成功表达了H5N1亚型AIV NS1基因蛋白,具有与感染H7N2亚型AIV阳性血清反应原性.

关键词：禽流感病毒、非结构蛋白、表达

所属期刊栏目：12

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：科技部攻关项目02-02;国家科技攻关项目2004BA519A24

在线出版日期：2005-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：208-211