冷刺激对小鼠肺泡巨噬细胞表型的影响

摘要：

目的 探讨冷刺激对小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)表型的影响.方法 将MH-S细胞置37 ℃培养24h,于36、34、32 ℃分别冷刺激0、0.5、1、3、6、9、12h,qRT-PCR法检测MH-S细胞中炎性因子白介素-1β(interleukin-1p,IL-1β)及白介素-10(interleukin-10,IL-10)基因mRNA转录水平.将MH-S细胞置37 ℃培养24 h,于34 ℃冷刺激0.5 h,qRT-PCR法检测MH-S细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、精氨酸酶(Arginase1,Arg1)基因mRNA转录水平(以冷刺激0h为对照);免疫荧光法检测iNOS和Arg1的表达情况(以37 ℃培养0.5 h的MH-S细胞为阴性对照);Western blot法检测iNOS、TNF-α及核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的表达水平(以37 ℃培养0.5 h的MH-S细胞为阴性对照).结果 34 ℃培养0.5 h条件下,MH-S细胞中IL-1β及IL-10基因mRNA转录水平最高,因此采用该条件建立MH-S细胞的冷刺激模型.与0h比较,34℃培养0.5 h的MH-S细胞中iNOS、TNF-α和Arg1基因mRNA转录水平均明显升高(t分别为3.733、12.190、6.793,P均＜0.05).与阴性对照组比较,刺激组MH-S细胞中iNOS及Arg 1的荧光表达强度均有所增强,其中iNOS增强更为明显.与阴性对照组比较,刺激组MH-S细胞中iNOS和TNF-α蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义(t分别为0.675和1.514,P均＞0.05);NF-κB表达水平明显升高(t=3.092,P＜0.05).结论 34 ℃冷刺激0.5 h可提高MH-S细胞中IL-1β、IL-10、TNF-α、iNOS、Agr1、NF-κB等炎性相关因子的表达,可激活MH-S细胞中的NF-κB信号通路,诱导炎症蛋白表达,促进细胞活化.

关键词：冷刺激、小鼠肺泡巨噬细胞、MH-S细胞、炎性因子

所属期刊栏目：36

分类号：Q256;Q254(细胞生理学)

资助基金：国家自然科学基金31672513

在线出版日期：2023-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：930-934,940