SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法的建立及验证
目的 建立严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法,并进行验证,以期更好地控制产品安全性.方法 通过磁珠法对SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)原液进行DNA提取,采用探针型PCR对宿主细胞DNA残留量进行定量分析.对建立的方法进行线性范围、重复性、中间精密度、定量限、专属性、耐用性、准确度验证,并使用该方法对5批SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)进行宿主细胞DNA残留量检测.结果 DNA标准曲线在300～0.003 pg/μL范围内线性良好(R2均≥ 0.99);重复性和中间精密度验证相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均＜20％;定量限为0.001 pg/μL;样品稀释液与纯化液稀释液对检测无干扰;样品于53、55、57 ℃条件下孵育60 min及55 ℃条件下孵育56、60、64min的检测结果无明显差异;准确度验证回收率在79％～83％,RSD＜5％.用该方法检测SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)原液中DNA残留量适应性良好.结论 成功建立了 SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量荧光定量PCR检测方法,该方法线性范围、重复性、中间精密度、定量限、专属性、耐用性和准确度均符合可接受标准,适用于SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)中宿主细胞DNA残留量的检测及质量控制.
SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)、宿主细胞DNA残留、荧光定量PCR
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R183.3(流行病学与防疫)
国家重点研发计划2020YFC0841800
2023-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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