高表达花烟草防御素1基因K326烟草叶片总蛋白的提取及其生物活性分析
目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性.方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度.滤纸片法检测总蛋白对真菌的抑菌活性,CCK-8法检测对癌细胞(HeLa细胞)的抑制活性.结果 花烟草花、WT及转基因K326烟草叶片总蛋白浓度分别为11.25、10.33和10.14 mg/mL.转基因K326烟草叶片总蛋白对白色念珠菌的抑菌活性为(85.68±3.08)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.33和1.14倍(F=15 339,P<0.05);对尖孢镰刀菌的抑菌活性为(148.48±2.47)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.09和1.08倍(F=4 927,P<0.05).转基因K326烟草叶片总蛋白对HeLa细胞的IC50最小(6.11 mg/mL),抑制活性分别为WTK326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.56和1.21倍(F=89748,P<0.05).结论 高表达NaD1基因的K326烟草总蛋白具有良好的抑菌和抗癌生物活性,本研究为以烟草作为生物反应器生产抑菌和抗癌生物制剂提供了实验依据.
K326烟草、花烟草防御素1、转基因、生物活性
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Q512(蛋白质)
贵州省高层次创新型人才培养黔科合人才号;中国烟草总公司贵州省公司科技项目
2023-08-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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