人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖抗体IgG含量间接ELISA定量检测方法的验证及应用
目的 验证人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖(分别简称福氏2a多糖及宋内多糖)抗体IgG含量的ELISA定量检测方法,并用于福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后人血清样本的检测.方法 将参考血清及质控血清按一定比例混合,制备成10份不同浓度的血清样本(编号为S1～S10),采用企业提供的间接ELISA定量检测方法检测样本,连续测定6 d,计算多糖抗体IgG回收率和变异系数(coefficient of variation,CV),并以回收率CV低于20％的相应参考血清含量作为定量限(limit of quantitation,LOQ).采用相同检测方法连续6 d测定血清样本S10及质控血清,每天重复检测3次,计算CV;采用参考血清进行多糖竞争抑制ELISA试验,计算血清对多糖的抑制率.采用企业提供的方法检测参考血清,确定线性范围,获得曲线方程,计算相关系数(R2).采用验证的方法检测1 842份福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后的人血清样本.结果 10份血清样本中福氏2a和宋内多糖抗体IgG回收率分别为73.21％～222.68％和83.67％～123.56％;试验间及试验内精密性CV均＜30％;参考血清对100 μg/mL福氏2a和宋内多糖的抑制率分别为85.95％和88.42％;福氏2a和宋内多糖抗体IgG检测的线性范围分别为0.05～0.125和0.025～0.125 EU/mL,R2均≥0.99,LOQ分别为0.050和0.025 EU/mL.福氏宋内痢疾双价疫苗免疫后血清IgG含量大幅高于免疫前.结论 企业提供的ELISA定量检测方法具有良好的准确性、精密性及特异性,可用于痢疾疫苗免疫血清的检测.
多糖、抗体IgG、酶联免疫吸附试验、志贺菌、痢疾疫苗
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R446.6(诊断学)
国家科技重大专项2018ZX09101-001
2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
714-718,723
