人用狂犬病疫苗(Vero细胞)宿主残余DNA qPCR检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立能够进行定性及定量分析的人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液宿主残余DNA检测的qPCR法,并进行验证.方法 用Vero细胞DNA定量国家标准品建立qPCR标准曲线,磁珠法提取Vero细胞残余DNA.对该方法进行专属性、重复性、中间精密度、准确度及耐用性验证,并确立线性范围及定量限.用该方法对3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液残余DNA进行定量分析及片段大小定性分析.结果 采用qPCR法检测Vero细胞DNA定量国家标准品,标准曲线相关系数(R2)均＞0.99,DNA检测范围为0.3 pg/mL～30 ng/mL.该方法专属性、重复性好,中间精密度、准确度及耐用性验证中,样品检测结果的相对标准偏差(RSD)均＜10％.3批原液Vero细胞残余DNA含量为0.20～0.77 ng/剂,符合《中国药典》三部(2020版)相关标准;残余DNA＞154 bp的片段占52％～63％.结论 建立的方法专属性、重复性、中间精密度、耐用性好,可快速、准确地进行残余DNA的定性及定量分析,对人用狂犬病疫苗(Vero细胞)生产过程中和最终产品残余DNA含量的检测及控制具有重要意义.

关键词：人用狂犬病疫苗、Vero细胞、残余DNA、实时荧光定量聚合酶链反应

所属期刊栏目：36

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：吉林省科技发展计划20200404119YY

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：707-713