靶向CD73/PD-L1双特异性抗体的制备及其体外抗肿瘤功能评价
目的 制备同时靶向胞外5'-核苷酸酶(cluster of differentiation 73,CD73)与程序性细胞死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)的双特异性抗体,并对其体外结合能力和杀伤能力进行评价.方法 采用基因工程方法,将PD-L1单链抗体(single-chain fragment variable,scFv)插入至CD73单抗铰链区中,构建抗CD73/PD-L1双特异性抗体(BS-21),通过CHO GS表达系统进行筛选,获得高表达量细胞株,经Protein A及分子筛纯化后,采用分子排阻高效液相色谱法(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测抗体纯度;流式细胞术检测抗体体外结合能力;通过外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外杀伤人肺癌细胞Calu1检测抗体体外杀伤能力.结果 经加压筛选获得了高产的细胞株;经纯化获得纯度为99.6％的双特异性抗体BS-21,该抗体能同时结合CD73和PD-L1分子;与anti CD73和anti PD-L1组相比,BS-21组显著提高免疫细胞对Calu 1肿瘤细胞的杀伤率(F均为30.36,P均＜0.001).结论 双特异性抗体BS-21能同时降低CD73和PD-L1对免疫细胞的免疫抑制作用,具有较好的抗肿瘤功能.
肿瘤微环境、双特异性抗体、5’-核苷酸酶、程序性细胞死亡配体1、体外结合能力、体外杀伤能力
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R392
福建省自然科学基金项目;福建省卫生健康科研人才培养项目
2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
687-692,699
