解聚素-金属蛋白酶17缺失对鼻咽癌细胞活性氧产生及线粒体功能的影响
目的 探讨解聚素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloprotease 17,ADAM17)缺失对鼻咽癌细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生及线粒体功能的影响.方法 将3组ADAM1 7基因干扰质粒ADAM17 shRNA及空质粒ADAM17-shRNA-NC转染鼻咽癌细胞株(CNE1),RT-PCR及Western blot法检测干扰效率,选择干扰效果最好的shRNA进行后续试验.CCK-8法检测各组细胞增殖能力;克隆形成试验检测细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况和线粒体膜电位变化;荧光显微镜检测细胞线粒体氧化损伤产物ROS水平;丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测细胞氧化应激标志物MDA和SOD含量;Western blot法检测细胞线粒体损伤标记物 Bax/Bcl-2、cleaved-caspase 9/caspase 9、cleaved-caspase 3/caspase 3、c-Myc 的表达.结果 ADAM17-shRNA2组干扰效果最好.与shRNA-NC组相比,ADAM17-shRNA2组细胞的增殖速率明显下降(t=8.964,P=0.036);形成的集落数明显减小(t=10.351,P=0.014);细胞凋亡数量明显增加(t=11.25,P=0.008);细胞内代表ROS水平的荧光强度明显增强;线粒体膜电位明显下降(t=9.233,P=0.013);SOD含量明显降低(t=7.233,P=0.034),MDA 含量明显升高(t=7.415,P=0.038);细胞中 Bax/Bcl-2、cleaved-caspase 9/caspase 9、cleaved-caspase3/caspase 3的水平均明显升高(t分别为8.985、9.021 和7.789,P分别为0.023、0.011 和0.031),c-Myc蛋白表达水平明显减少(t=10.352,P=0.004).结论 干扰ADAM17基因表达通过促氧化诱导SOD水平下降,MDA水平升高,进而缓解细胞膜的氧化损伤;同时促进细胞线粒体ROS表达水平,降低线粒体膜电位,体外抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
解聚素-金属蛋白酶17、鼻咽癌、活性氧、线粒体
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R739.63(肿瘤学)
河北省卫生健康委员会科研基金项目20150788
2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
566-573
