猪外周血淋巴细胞干扰素诱导跨膜蛋白的拓扑学分析及其在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染后转录水平的变化

摘要：

目的 对猪外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBMCs)干扰素诱导跨膜蛋白(IFN-induced transme-mbrane,IFITM)进行拓扑学分析,并检测PBMCs在体外感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respi-ratory syndrome virus,PRRSV)后IFITM基因mRNA转录水平的变化.方法 无菌采集PRRSV、猪圆环病毒2(porcine circovirus 2,PCV2)和乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)阴性的仔猪抗凝血,分离PBMCs,PCR扩增猪IFITM CDS序列,测序并进行拓扑学分析.PBMCs体外感染PRRSV,分别于感染后12、24、36和48 h收集细胞样品,RT-PCR法检测PBMCs中PRRSV感染情况,qRT-PCR法检测IFITM1、IFITM2和IFITM3基因mRNA转录水平的变化.结果 成功分离到猪PBMCs,并克隆获得了PBMCs源IFITMCDS全长序列,猪IFITM蛋白可能存在两种拓扑学结构.PBMCs接种PRRSV后24 h可产生明显的细胞病变.PRRSV可在PBMCs中复制.PRRSV感染早期可显著上调PBMCs中IFITM1、IFITM2和IFITM3基因mRNA的转录水平,且均在感染后第12h达高峰,随后逐渐下降;IFITM1基因mRNA的转录水平在病毒感染后第36 h有所回升,然后又迅速回落.结论 PRRSV体外感染PBMCs可显著上调猪IFITM基因mRNA的转录水平,表明IFITM参与PBMCs抗病毒免疫反应.本研究为揭示机体抗PRRSV天然免疫反应提供了参考.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征、外周血淋巴细胞、干扰素刺激基因、干扰素诱导跨膜蛋白

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分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;内蒙古自治区布鲁氏菌病防治工程技术研究中心开放课题;内蒙古民族大学博士启动基金;内蒙古民族大学博士启动基金

在线出版日期：2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：551-558