电荷修饰流感疫苗脂质体的免疫效果
目的 检测电荷修饰脂质体的理化性质,并评价其作为流感疫苗佐剂的免疫增强效果.方法 以大豆卵磷脂、胆固醇、2,3-二油氧基丙基-三甲基氯化铵[N-1-(2,3-Dioleyloxy)propyl-N,N,N-trimethylam-moniumchloride,DOTAP]与 1,2-二油酰基磷脂酰胆碱(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine,DOPC)(DOTAP与DOPC质量比为 1 ∶4、2 ∶3、3 ∶2、4 ∶1)为膜材,制备4种电荷修饰的脂质体.将四价流感疫苗分别与制备的4种脂质体按1.4 ∶1.0的体积分数混合,通过冻融-冻干法将混合液制备为阳离子修饰的流感疫苗脂质体冻干粉.用PBS复溶脂质体冻干粉,采用激光粒度仪测定粒径及Zeta电位,Lowry法测定脂质体包封率.将231只雌性KM小鼠随机分为阴性对照组(PBS)、阳性对照组(四价疫苗原液)、阳离子脂质体组(4种电荷修饰的流感疫苗脂质体)和中性脂质体组(未经电荷修饰的流感疫苗脂质体),均经腹腔注射,0.2 mL/只,免疫后7、14、28 d,采用MTT法和T淋巴表面标记法评价其细胞免疫效果;免疫后3、7、14、28、42、56d,采用血凝抑制(hemagglutinin inhibition,HI)试验评价其体液免疫效果.结果 DOTAP与DOPC质量比为4 ∶1时,阳离子修饰脂质体的粒径和Zeta电位达最大,分别为529.65 nm和12.05 mV,此时包封率也较高,为81.82％.4个比例的阳离子脂质体组小鼠脾细胞的刺激指数(stimulus index,SI)及CD4+/CD8+值均明显高于阴性对照组(F=4.651～25.866,P均＜0.05),其中4 ∶1比例组的两项指标均高于其他3个比例组;且该组小鼠于免疫后3d即产生了早期体液免疫效果,免疫后42d抗体滴度达最高,在整个免疫周期内均维持较高水平.结论 不同电荷修饰的阳离子脂质体均能提高流感疫苗的免疫效果,其中DOTAP与DOPC质量比为4 ∶1时的免疫增强效果最好,免疫效应持续时间最长.
脂质体、电荷修饰、2、3-二油氧基丙基-三甲基氯化铵、1、2-二油酰基磷脂酰胆碱、流感疫苗、免疫原性
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R392-3
云南省生物医药重大科研专项基金资助项目2018ZF006
2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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