基于补体依赖的水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价检测方法的建立及应用
目的 建立基于补体依赖的水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)中和抗体效价检测方法并进行应用,以提高传统噬斑减少中和试验检测VZV抗体效价的灵敏度.方法 将抗原(水痘减毒活疫苗)、抗体(人VZV免疫球蛋白)以不同比例、不同时间混合孵育,中和后接种于6孔板培养的人二倍体细胞2BS株培养7～10 d,考马斯亮蓝染色计数噬斑数,通过Karber公式计算50％中和抗体滴度.在最佳中和条件下,通过改变补体(冻干豚鼠血清)添加量来探讨补体对中和试验灵敏度的影响,评估补体的最佳添加剂量.根据确定的中和试验参数,分别采用传统蚀斑法和补体依赖的蚀斑法对12份抗VZV小鼠血清和14份抗VZV人血清进行中和抗体效价检测.结果 确定了检测方法的关键参数:VZV标准抗原使用滴度为500～1 000 PFU/mL,补体在抗原抗体中和体系中添加的比例为1:10(v/v),中和条件为37℃中和1 h.补体依赖的蚀斑法和传统蚀斑法检测抗VZV小鼠血清抗体均为阳性,但传统蚀斑法检测抗体效价普遍偏低,接种2剂水痘减毒活疫苗的小鼠抗体水平显著高于接种1剂水痘减毒活疫苗的小鼠(t=0.45,P＜0.05);两种方法检测抗VZV人血清抗体均为阳性.结论 建立了补体依赖的VZV中和抗体效价检测方法,补体的添加显著提高了中和抗体检测的灵敏度.用该方法评价不同免疫策略的小鼠血清的中和抗体效价,得出2剂疫苗的免疫效果优于1剂.
水痘-带状疱疹病毒、中和抗体效价、补体、中和试验
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R-331(医学研究方法)
吉林省科技发展计划项目20200404191YY
2023-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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