苦豆碱对白细胞介素-1β诱导软骨细胞损伤的作用及其机制
目的 探讨苦豆碱(aloperine,ALO)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导软骨细胞损伤的作用及其机制.方法 将软骨细胞随机分为①空白对照(Con)、IL-1β、IL-1β+ALO-L(25 mg/L)、IL-1β+ALO-M(50 mg/L)、IL-1β+ALO-H(100 mg/L)组;②Con、IL-1β、IL-1β+miR-NC、IL-1β+miR-16-5p组;③Con、IL-1β、IL-1β+si-NC、IL-1β+si-SOX5组.IL-1β组细胞加入10ng/mL的IL-1β,Con组不进行任何处理.qRT-PCR法检测软骨细胞中miR-16-5p 和 SOX5基因 mRNA转录水平;ELISA法检测 IL-6、TNF-α和 IL-1β含量;Western blot法检测 Bcl-2、Bax、SOX5蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与IL-1β组比较,IL-1β+ALO-L、IL-1β+ALO-M、IL-1β+ALO-H组软骨细胞中IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(t=5.002～20.653,P均＜0.001),细胞凋亡率显著降低(t=5.473～17.371,P均＜0.001),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(t=7.800～16.100,P均＜0.001),Bax蛋白表达水平显著降低(t=4.993～14.311,P均＜0.001);miR-16-5p基因mRNA转录水平显著升高(t=6.688～16.545,P均＜0.001),SOX5基因mRNA转录水平及其蛋白表达水平均明显降低(t=4.609～15.393,P均＜0.001).与IL-1β+miR-NC组比较,IL-1β+miR-16-5p组min-16-5p基因mRNA转录水平明显升高(t=17.106,P＜0.001),IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(t=15.030～20.013,P均＜0.001),细胞凋亡率明显降低(t=12.273,P＜0.001),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(t=15.652,P＜0.001),Bax蛋白表达水平显著降低(t=12.999,P＜0.001).与IL-1β+si-NC组比较,IL-1β+si-SOX5组SOX5蛋白表达水平显著降低(t=13.444,P＜0.001),IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(t=14.087～17.103,P均＜0.001),细胞凋亡率明显降低(t=11.991,P＜0.001),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(t=13.864,P＜0.001),Bax蛋白表达水平显著降低(t=11.818,P＜0.001).结论 ALO可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,从而降低软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节软骨细胞中miR-16-5p和SOX5表达水平及炎症因子的分泌水平实现的.
苦豆碱、白细胞介素-1β、软骨细胞、Y染色体上的性别决定区相关高迁移率族盒蛋白-5、miR-16-5p
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R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
河北省中医药科研课题2016066
2023-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
434-441,447
