H5N1型流感病毒灭活疫苗(MDCK细胞)原液蛋白成分分析
目的 对H5N1型流感病毒灭活疫苗(MDCK细胞)原液蛋白成分进行分析,为完善该疫苗的质量控制方法及疫苗的研发提供依据.方法 将H5N1型流感病毒株接种于MDCK细胞,病毒培养48 h后,收获病毒液,经澄清、超滤浓缩、β-丙内酯灭活、Capto Q和Sephorase 4FF两步层析纯化,获得原液样品.应用透射电镜分析样品中病毒颗粒的形态;单向免疫扩散(single radial immunodiffusion,SRID)试验鉴别病毒原液血凝素(hemagglutinin,HA);高效液相色谱进行纯度分析;梯度SDS-PAGE进行蛋白电泳分析;液质联用仪(LC/MS)结合对回收的各条带蛋白多肽进行二级质谱序列测定的方法分析样品中所含的蛋白成分.结果 在透射电镜下可观察到80～120 nm球形H5N1流感病毒颗粒,呈典型的流感病毒形态;鉴别试验表明病毒原液抗原性与病毒株相一致;经梯度SDS-PAGE分析,病毒原液有2条带;LC/MS质谱分析显示,原液样品中H5N1型流感病毒蛋白为主要成分,包括H5N1型流感病毒的NP、M1、HA、NA等蛋白.结论 对H5N1型流感病毒灭活疫苗制备过程中原液的蛋白成分进行了分析,为该类疫苗的研发及质量控制提供了参考依据.
H5N1型流感病毒、疫苗、病毒原液、质谱分析
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R181.1(流行病学与防疫)
湖北省重点研发计划2020DCC002
2023-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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