森林脑炎病毒滴度检测蚀斑法的建立及验证

摘要：

目的 建立原代地鼠肾(primary hamster kidney,PHK)细胞适应的森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)株(简称PHKT株)感染性滴度检测的蚀斑法,并对建立的方法进行验证.方法 将主代鼠脑适应株TBEV感染原代地鼠肾PHK细胞,连续传12代.分别采用蚀斑法(将不同代次PHKT以不同稀释倍数感染单层BHK-21细胞,中性红染色,计算蚀斑数)和小鼠脑内攻毒滴定法(将不同代次PHKT以不同稀倍数经脑腔攻击小鼠,0.03 mL/只,连续观察14 d,Reed-Muench方法计算半数致死量)检测PHKT滴度,并对两种方法检测结果的相关性进行分析.对建立的检测TBEV滴度的蚀斑法进行专属性、重复性和中间精密度验证.结果 PHKT病毒蚀斑滴度最高达8.9 lgPFU/mL;蚀斑法与小鼠脑内攻毒滴定法检测结果相关性较好(r=0.92);蚀斑法检测PHKT病毒感染性滴度专属性良好,重复性和中间精密度变异系数(CV)均＜5％.结论 建立了检测PHKT感染性滴度的蚀斑法,可作为小鼠脑内攻毒滴定法的替代方法.

关键词：森林脑炎病毒、蚀斑法、小鼠脑内攻毒滴定法、感染性滴度、森林脑炎灭活疫苗

所属期刊栏目：36

分类号：R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：吉林省省级医药健康产业发展专项基金项目20210204206YY

在线出版日期：2023-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：207-210,216