甲型肝炎病毒SYX1株在人二倍体细胞MRC-5上的适应性及遗传稳定性
目的 探讨甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)SYX1株在人二倍体细胞MRC-5上的适应性及遗传稳定性.方法 将来源于甲肝患者粪便的HAV SYX1株接种至MRC-5细胞,连续传代至第28代,检测第1～26代病毒的抗原含量和病毒滴度;镜下观察第6代病毒的形态,并检测其理化性质.取第13～15代病毒进行病毒增殖动态研究,确定病毒增殖高峰期.选择第8、12、18、20、22、25、26和28代病毒,提取病毒基因组RNA进行序列测定,分析其遗传稳定性.建立HAVSYX1株主种子批和工作种子批,按照《中国药典》三部(2020版)要求进行检定.结果 HAVSYX1株在MRC-5细胞上连续传至8代后,抗原含量稳定在160～320 EU/mL之间,病毒滴度维持在7.3～8.3 lgCCID50/mL;病毒颗粒有空心和实心两种类型,直径为27～32 nm,呈球形,无包膜,表面无突起;可耐受低pH及乙醚.确定病毒增殖高峰期为10 d,抗原含量达160 EU/mL以上,病毒滴度达7.0 lgCCID5o/mL以上.HAV SYX1株为HAV IB亚型,传代过程中所有结构蛋白编码区基因序列未发生突变.HAV的主种子批和工作种子批的各项检定结果均符合相关要求.结论 HAVSYX1株在MRC-5上传代具有良好的适应性及遗传稳定性,可用于甲肝灭活疫苗的研究及生产.
甲型肝炎病毒SYX1株、人二倍体细胞MRC-5、适应性、遗传稳定性
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R392-33
辽宁省科学技术计划项目2014226004
2023-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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