一种体外评价佐剂诱导人急性白血病单核细胞THP-1炎症因子方法的建立
目的 以人急性白血病单核细胞THP-1为模型,建立一种体外评价佐剂诱导人源化细胞炎症因子水平的方法.方法 以细菌内毒素标准品为阳性对照,与佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)共刺激THP-1细胞,检测炎症因子IL-8、干扰素诱导蛋白-10(interferon-induced protein,IP-10)、IL-1β及单核细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein,MCP-1)的分泌水平,分别对PMA终浓度(25、5、1、0.1 ng/mL)、刺激时间(4、16、24h)和细胞密度(1×105、5×105、1×106个/mL)进行优化,确定最佳条件.用不同佐剂[(Toll样受体(toll-like receptors,TLR)激动剂类佐剂Pam2CSK4和TLR4以及乳剂类佐剂MF59和AS03]与PMA刺激THP-1细胞,考察不同佐剂刺激产生炎症因子的水平.结果 炎症因子IL-8、IP-10、IL-1β、MCP-1的最佳诱导条件分别为:PMA终浓度0.1、1、5、1ng/mL,培养时间16、16、4、24h,细胞密度均为1×106个/mL.不同佐剂诱导产生的炎症因子水平不同,其中Pam2CSK4和LPS-B5大于0.001 μg/mL即可诱导产生较高水平的炎症因子,而MF59和AS03诱导产生的炎症因子水平较低.结论 成功建立了一种体外检测方法,可用于评价佐剂诱导产生的炎症因子IL-8、IP-10、IL-1β,、MCP-1水平,为佐剂反应原性的研究提供了参考.
佐剂、THP-1细胞、炎症因子
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R392-33
国家科技重大专项2017ZX10202201
2023-02-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1482-1487,1494
