去除无细胞百日咳疫苗丝状血凝素纯化液中内毒素TritonX-114液相分离法的建立及其效果评价
目的 建立去除无细胞百日咳疫苗丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)纯化液中内毒素的TritonX-114液相分离法,并评价其效果.方法 以影响TritonX-114液相分离法效果的TritonX-114加入量、4℃混匀时间、37℃分层时间、25℃16 743 xg离心时间为试验因素,每个因素设计3个水平,通过正交试验设计12组试验.每组试验获得的样品均检测蛋白回收率,以蛋白回收率最高的条件为最佳.采用最佳条件去除3批无细胞百日咳疫苗FHA纯化液内毒素,检测FHA蛋白含量、内毒素含量及TritonX-114残留量.结果 TritonX-114液相分离法最佳条件:TritonX-114加入量为1%,4℃混匀时间为30 min,37℃分层时间为60 min,25℃167 43 x g离心时间为10 min.最佳条件下去除3批无细胞百日咳疫苗FHA纯化液内毒素后,内毒素含量均<0.25 EU/mL,TritonX-114残留量均值为0.183%,蛋白回收率均值为91.04%.结论 TritonX-114液相分离法能够有效去除无细胞百日咳疫苗FHA纯化液中的内毒素,且方法耗时短,操作简便.
百日咳疫苗、内毒素、TritonX-114液相分离法、丝状血凝素
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R331(人体生理学)
云南省科技创新人才计划;昆明市科技局重点项目
2023-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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