抗H5N1禽流感病毒M1蛋白全人源胞内抗体的制备及纯化

摘要：

目的 制备抗H5N1禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)M1蛋白全人源胞内抗体TAT-ScFv M1-mFc,并进行纯化.方法 从pET28(a)-TAT-ScFv M1质粒中通过PCR扩增目的基因片段TAT-ScFv M1,将该片段与表达载体pET32(a)-HisTag-Sumo-mFc 连接,构建重组表达质粒 pET32(a)-HisTag-Sumo-TAT-ScFv M1-mFc,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达目的蛋白.通过金属螯合层析、Sumo酶切及亲和层析等方法对目的蛋白进行纯化,ELISA法检测抗体的亲和活性.结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确.重组蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约80 000.制备的胞内抗体具有明显结合M1蛋白的活性.结论 获得了具有亲和活性的抗H5N1 AIV M1蛋白的全人源胞内抗体蛋白TAT-ScFv M1-mFc,为进一步开发针对AIV H5N1的抗体药物奠定了基础.

关键词：H5N1禽流感病毒、M1蛋白、全人源抗体、胞内抗体

所属期刊栏目：35

分类号：S831.7(家禽)

资助基金：吉林省重点研发计划;军队后勤项目

在线出版日期：2022-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1200-1204