重组金黄色葡萄球菌肠毒素B的原核表达、纯化及其免疫原性
目的 对金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)基因定点突变体进行克隆、表达及纯化,并检测其免疫原性,为研制马抗SEB免疫球蛋白F(ab')2制品奠定基础.方法 对SEB基因序列进行定点突变和修饰以及偏性密码子优化后,构建重组表达质粒pET-22b-SEB,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达重组SEB蛋白,经离子交换层析纯化后,HPLC法检测重组SEB蛋白抗原纯度.Western blot法检测重组SEB蛋白抗原免疫活性;将不同浓度重组SEB蛋白抗原腹腔注射BALB/c小鼠,进行致病力、抗体效价、中和抗体活性检测.结果 质粒pET-22b-SEB经双酶切及测序鉴定证明构建正确.纯化的重组SEB蛋白相对分子质量约28 300,纯度大于90％,与天然SEB具有一致的免疫活性,且具有良好的安全性;免疫小鼠抗体效价达1∶81 920,可有效诱导小鼠产生中和抗体.结论 成功对SEB进行了定点突变减毒,经克隆、表达及纯化获得高纯度的重组SEB蛋白抗原,具有良好的免疫原性.
金黄色葡萄球菌肠毒素B、重组抗原、表达、纯化、免疫原性
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R392-33
国家重点研发计划;国家重点研发计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金;内蒙古自治区自然科学基金项目
2022-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1065-1068,1075
