MDCK细胞流感疫苗层析工艺的建立

摘要：

目的 建立MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺.方法 采用Cellufine Sulfate亲和层析柱纯化MDCK细胞流感病毒液,并对洗脱缓冲液盐浓度(0.5、1、1.5 mol/L NaCl)、线性流速(50、100、150 cm/h)及样品浓缩倍数(1、2、5倍)进行优化.采用优化方法连续上样40个柱体积,计算亲和层析结合HA的动态结合载量.采用优化方法检测3批MDCK细胞流感病毒液血凝素(hemagglatinin,HA)含量、宿主DNA残留量和宿主蛋白残留量,并计算HA回收率、宿主DNA去除率及宿主蛋白去除率.同时采用优化方法及分子筛层析Sepharose 4FF纯化同批MDCK细胞流感病毒液,比较纯化效果.结果 最佳洗脱缓冲液盐浓度为1.5 mol/L NaCl,线性流速为100 cm/h,样品浓缩倍数为5倍.最佳条件下纯化产物HA回收率为80％,宿主DNA去除率为99％,宿主蛋白去除率达80％以上.亲和层析结合HA的动态结合载量为2 072 μg/mL介质.与分子筛层析Sepharose 4FF比较,Cellufine Sulfate亲和层析纯化样品HA回收率及DNA去除率均有提高,宿主蛋白去除率略有下降.结论 建立的MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺具有较高的杂质去除率,为细胞流感疫苗大规模纯化奠定了基础.

关键词：流感病毒、MDCK细胞、亲和层析

所属期刊栏目：35

分类号：Q939.4(微生物学)

资助基金：国家科技重大专项;吉林省科技发展计划项目;中央引导地方科技发展资金

在线出版日期：2022-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：992-996