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卡介苗活性快速检测方法的建立及验证

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目的 建立卡介苗(Bacille Calmette-Guérin vaccine,BCG)活性的快速测定方法,并进行初步验证.方法 将ATP标准品稀释为6.25×10-10~2×10-8mol/L,采用生物荧光法进行检测,获得相对荧光强度(relative light unit,RLU),建立ATP浓度与RLU的标准曲线.分别通过离心法、本底法和ATP酶法提取9批低剂量(0.25、0.375、0.5 mg/mL)和6批高剂量(60 mg/mL)BCG的ATP,采用生物荧光法检测ATP含量,并评价其与活菌数(活菌计数法检测)的相关性.验证该方法的重复性和中间精密性.结果 ATP浓度在6.25×10-10~2×10-8 mol/L范围内,与RLU呈良好线性关系,回归方程为y=1 680.4x-574.46,R2=0.998 7.离心法提取高剂量及低剂量BCG的ATP的含量与相应活菌数无显著相关性(P>0.05);本底法和ATP酶法提取高剂量BCG的ATP的含量与相应活菌数具有显著相关性(P<0.05),两种方法提取低剂量BCG的ATP的含量与相应活菌数无显著相关性(P>0.05).重复性和中间精密性验证的RSD均<8%.结论 建立的高浓度BCG活性的快速检测方法具有良好的重复性和中间精密性.

卡介苗、活性、生物荧光法、ATP含量、活菌数

35

Q93-33(微生物学)

国家科技重大专项2018ZX10731301

2022-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

464-467,474

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中国生物制品学杂志

1004-5503

22-1197/Q

35

2022,35(4)

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