人骨髓间充质干细胞培养上清在SH-SY5Y细胞氧化应激损伤修复中的作用及其机制
目的 探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)培养上清(hBMSCs-Sup)在SH-SY5Y细胞氧化应激损伤修复中的作用及其机制.方法 将SH-SY5Y细胞分为4组:分别用含等容积磷酸盐缓冲液(对照组)、不同浓度 1-甲基-4-苯基吡啶离子(l-methyl-4-phenylpyridine ion,MPP+)(0.25、0.5、1、2、4 mmol/L)、0.25 mmol/L MPP++hBMSCs-Sup 或 0.25 mmol/L MPP++无外泌体的 hBMSCs-Sup(hBMSCs-Supexo-)完全培养基培养不同时间(24、48和72 h),通过MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及细胞凋亡率,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达.结果 SH-SY5Y细胞的活性随着MPP+浓度的增加以及处理时间的延长逐渐下降.与对照组相比,MPP+组细胞存活率显著下降(P<0.001),ROS含量和凋亡率显著升高(P<0.001),凋亡相关蛋白Bax表达显著增加(P<0.01),增殖相关蛋白P-Akt和抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达显著减少(P<0.01);与MPP+组相比,MPP++hBMSCs-Sup组细胞存活率显著升高(P<0.001),ROS含量和凋亡率显著降低(P<0.001和<0.01),Bax蛋白表达显著下降(P<0.05),P-Akt和Bcl-2蛋白表达显著增加(P<0.05);MPP++hBMSCs-Supexo-组细胞存活率和ROS含量与单用MPP+组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 hBMSCs-Sup 通过其外泌体组分降低细胞内的ROS含量,激活AKT途径,恢复MPP+下调的SH-SY5Y细胞存活率和MPP+提高的SH-SY5Y细胞凋亡率.
人骨髓间充质干细胞、1-甲基-4-苯基吡啶离子、SH-SY5Y细胞、氧化应激、活性氧、细胞凋亡
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R741(神经病学与精神病学)
吉林省科技发展计划20200404125YY
2022-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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