表达诺如病毒衣壳蛋白的重组腺病毒疫苗的构建及其免疫原性分析
目的 构建表达诺如病毒(norovirus,NoV)衣壳蛋白VP1和VP2基因的重组腺病毒疫苗,并检测其在小鼠体内的免疫原性.方法 以5型腺病毒为载体,制备表达NoV主要衣壳蛋白VP1以及同时表达VP1、VP2和3'UTR区的两种重组腺病毒载体,通过PCR和Western blot法对重组腺病毒进行体外鉴定.将两组重组腺病毒以108 IU/只的剂量灌胃免疫BALB/c小鼠,共免疫2次,间隔3周.采用ELISA和ELISPOT等方法检测两组重组腺病毒诱导的体液免疫、黏膜免疫和细胞免疫反应.结果 重组腺病毒pkAd5ES-VP1和pkAd5ES-VP1-2的病毒滴度分别为3.4×109和2.4 x 109 IU/mL.两种重组腺病毒均能在真核细胞中高效表达外源基因.VP1+VP2+3'UTR区共表达的重组腺病毒在灌胃免疫时能有效提升小鼠粪便IgA、血清组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)阻断抗体水平以及脾脏IL-4分泌细胞的数量.结论 与单独表达VP1比较,VP1+VP2+3'UTR区共同表达的重组腺病毒疫苗具有更好的免疫原性.本研究为高效口服NoV疫苗的研发提供了参考.
诺如病毒、VP2、重组腺病毒、体液免疫、黏膜免疫、细胞免疫
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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金21934005
2022-06-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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