重组人白细胞介素-1受体拮抗剂生物学活性检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1Ra)生物学活性检测方法,并对方法进行验证.方法 根据IL-1Ra阻断IL-1β杀伤人黑色素瘤细胞A375.S2的能力评价IL-1Ra的生物学活性,结果用标准品进行校正.对方法的样品起始浓度(8、10、12、14 μg/mL)和IL-1β终浓度(2、4、6 ng/mL)进行优化,并验证方法的专属性、准确度、线性范围、中间精密度、耐用性.用建立的方法检测本公司在研产品3批原液和3批成品的生物学活性.结果 确定该方法的样品起始浓度为8 μg/mL,IL-1β终浓度为4 ng/mL.IL-1Ra原液缓冲液成分及成品中辅料成分对检测结果无影响;线性范围为6～13 μg/mL,相关系数R2为0.9921;准确度验证线性回归方程的斜率为0.9758;不同试验人员于不同时间对1批原液、1批成品检测结果的几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)分别为13.895％和8.670％,均＜20％;不同细胞代次、不同细胞密度下相对效价测定值的GCV为5.595％,＜20％.用建立的方法检测3批原液和3批成品的结果较稳定.结论 成功建立了重组人IL-1Ra生物学活性检测方法,该方法准确度高,精密度好,耐用性强,检测结果稳定可靠,可用于产品的生物学活性评价和质量控制.

关键词：重组人白细胞介素-1受体拮抗剂;人黑色素瘤细胞;生物学活性;细胞增殖

所属期刊栏目：34

分类号：Q331(人工选择与自然选择)

资助基金：吉林省科技发展计划20160204034YY

在线出版日期：2021-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1370-1374