无血清悬浮培养MDCK细胞系的建立及生物反应器高密度培养
目的 建立无血清悬浮培养MDCK细胞系,分析该悬浮细胞的生长特性、病毒敏感性、代谢动力学特征及生物反应器线性放大的可行性.方法 通过逐步降血清和无血清悬浮驯化的方式获得1株MDCK悬浮细胞,检测其病毒敏感性,在1.2L四联平行生物反应器中分析该悬浮细胞以不同初始接种密度(50×104、100×104、150×104、200×104个/mL)培养的细胞生长特性、代谢动力学特征和最佳传代时间,并进行5L到75 L生物反应器的线性放大培养.结果 贴壁培养型MDCK细胞以3％低血清稳定培养5代后,将该细胞直接适应无血清培养基获得1株MDCK悬浮细胞(命名为MDCK-XF03)并建库,复苏活力为96.8％;细胞接种不同型别的流感病毒均能较好增殖;以不同初始接种密度培养MDCK-XF03细胞,其最大增殖浓度均达1000× 104个/mL以上,且差异无统计学意义(P＞0.05),在培养前48 h均具有较大比生长速率,且差异有统计学意义(P＜0.05),此时倍增时间也较短,且差异有统计学意义(P＜0.05),MDCK-XF03细胞在84 h之前可充分利用葡萄糖.结论 成功获得1株MDCK悬浮细胞MDCK-XF03,选择以200×104个/mL的初始接种密度进行生物反应器大规模培养,实现了从5L到75 L的高密度线性放大培养,为流感疫苗的工业化生产提供了细胞基质.
MDCK悬浮细胞;流感病毒;高密度增殖;放大培养
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S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)
重大新药创制"科技重大专项;教育部长江学者和创新团队发展计划项目;中央高校基本科研业务费专项西北民族大学项目
2021-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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