重组人肠道病毒71型病毒样颗粒等电点全柱成像毛细管等电聚焦电泳测定方法的建立及验证

摘要：

目的 建立重组人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)等电点(isoele-ctric point,pI)全柱成像毛细管等电聚焦电泳(whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing,WCID-CIEF)测定方法,并进行验证.方法 采用WCID-CIEF测定重组人EV71 VLPs的pI,对WCID-CIEF的聚焦时间和尿素浓度进行优化,并对方法的专属性、准确度、重复性和中间精密度进行验证.结果 选择3000 V聚焦5 min作为WCID-CIEF的聚焦条件,样品处理时不添加尿素.空白缓冲液对重组人EV71 VLPs pI的测定无干扰;WCID-CIEF分别重复测定pI marker 5.85和pI marker 7.05样品6次的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.18％和0.06％;重复测定6次重组人EV71 VLPs pI的RSD为0.08％;不同实验人员在不同日期重复测定12次重组人EV71 VLPs pI的RSD为0.14％.结论 WCID-CIEF测定重组人EV71 VLPs pI的专属性、准确度、重复性和中间精密度均良好,该方法快速、准确,可用于重组人EV71 VLPs的质量评价.

关键词：肠道病毒71型;病毒样颗粒;全柱成像毛细管等电聚焦电泳;等电点

所属期刊栏目：34

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：上海市科委生物医药领域科技支撑计划13431900600

在线出版日期：2021-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1358-1361,1369