C群脑膜炎球菌多糖层析纯化工艺条件的优化
目的 在保证分离效果、多糖回收率的前提下,优化层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖的工艺条件,以提高层析介质柱容量,同时降低脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SDC)使用量.方法 将C群粗糖样品溶于1% SDC的Tris-HC1缓冲液中进行预处理,用串联的装填Capto Adhere和Capto DEAE介质的层析柱,将多糖分离纯化,超滤脱盐后获得多糖原液.考察缓冲液中SDC含量、上样粗糖浓度、上样量对层析分离效果的影响,优化获得最佳工艺条件;在最佳工艺条件下,考察层析柱的使用寿命以利于层析介质的清洁再生.结果 层析流速控制在90 cm/h时,粗多糖上样浓度可提高至5 g/L,流动相SDC浓度降至0.5%,上样量升高至25%;超滤脱盐后SDC残留量<10 mg/g多糖;层析纯化可连续进行5次,且层析柱的纯化分离效果基本不受影响.结论 C群脑膜炎球菌多糖可在层析柱上流穿,在最优条件下,层析法可用于C群多糖制备时的分离及纯化.
C群脑膜炎球菌多糖;柱层析;纯化;优化
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R378(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家科技重大专项2020ZX09101-024
2021-12-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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