人凝血因子Ⅷ制品中聚山梨酯80残留量高效液相色谱-电喷雾检测器检测方法的建立及验证
目的 建立人凝血因子Ⅷ制品中聚山梨酯80残留量的高效液相色谱(HPLC)-电喷雾检测器(charged aerosol detection,CAD)检测方法,并进行验证及初步应用.方法 采用反相-离子交换混合色谱柱Oasis MAX (2.1 mm×20 mm,30 μm),流动相A为含2％(V/V)甲酸的异丙醇∶水(20∶80)溶液,流动相B为含2％ (V/V)甲酸的异丙醇溶液,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为30 μL,梯度洗脱,检测人凝血因子Ⅷ中聚山梨酯80残留量.验证方法的系统适用性、线性范围、检测限、定量限、重复性、稳定性及准确性,并与HPLC-蒸发光散射检测器(evaporative light scattering detector,ELSD)检测法进行比较.应用建立的HPLC-CAD方法检测10批人凝血因子Ⅷ样品中聚山梨酯80残留量.结果 聚山梨酯80与其他组分色谱峰分离度良好,无其他色谱峰干扰.经HPLC-CAD检测,聚山梨酯80标准品在12.8～256.3 μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程y=121.42x+1.3217,r=0.9980;定量限约为3.20 μg/mL,检测限约为1.07 μg/mL;供试品溶液重复检测6次聚山梨酯80含量的RSD为0.86％;供试品溶液室温放置0、2、4、6、8及10h聚山梨酯80含量的RSD为0.65％;浓度为32.8、41.0及49.2 μg/mL的加标样品回收率为96.85％～101.49％;该方法的定量限、检测限、重复性、稳定性、准确性指标均优于HPLC-ELSD.10批样品中聚山梨酯80残留量在56.09～66.75μg/mL,均符合《中国药典》三部(2015版)要求(≤100 μg/mL).结论 成功建立了检测人凝血因子Ⅷ制品中聚山梨酯80残留量的HPLC-CAD法,该方法重复性、稳定性及准确性良好,可用于检测人凝血因子Ⅷ制品中聚山梨酯80残留量.
人凝血因子Ⅷ;聚山梨酯80;高效液相色谱;电喷雾检测器
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R917(药物基础科学)
国家科技重大专项2017zx09101001-007
2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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