携带角质细胞生长因子和低氧诱导因子-1α双基因减毒沙门菌的遗传稳定性

摘要：

目的 探讨携带角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)和低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)双基因减毒沙门菌(Ty21a-pIRES-HIF-KGF,TPKH)的遗传稳定性.方法 将TPKH连续传代40代,每隔10代检测菌落和菌体的形态、质粒纯度及浓度;每隔5代进行菌落PCR鉴定.取初始代TPKH,接种至大鼠小肠上皮细胞(rat intestinal epithelial cells,IEC-6),于培养12、24、48、72 h时,检测KGF和HIF-1α蛋白的表达水平;取初始代、10、20、30、40代TPKH菌落,接种至IEC-6,培养48 h,检测KGF和HIF-iα蛋白的表达水平.结果 TPKH连续传代40代,菌落和菌体形态基本一致,所含质粒纯度和浓度变化较小,且均可扩增出目的 基因条带.初始代TPKH转染IEC-612 h,KGF和HIF-1α蛋白水平显著上升(P＜0.01);各代TPKH转染IEC-6后,KGF和HIF-1α蛋白水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TPKH具有良好的遗传稳定性,本实验为TPKH制剂的大规模生产奠定了基础.

关键词：角质细胞生长因子;低氧诱导因子-1α;减毒沙门菌;遗传稳定性

所属期刊栏目：34

分类号：R991(毒物学（毒理学）)

资助基金：甘肃省重点研发计划-社会发展类项目17Y1FA135

在线出版日期：2021-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：936-940