新型冠状病毒S蛋白抗体的制备及初步应用

摘要：

目的 制备新型冠状病毒S蛋白抗体,初步建立检测新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量的方法.方法 使用新型冠状病毒重组S蛋白分别免疫羊和兔,获得抗血清.采用间接ELISA法和微量中和试验检测抗血清效价,免疫印迹试验检测抗体特异性.采用蛋白G纯化树脂分别对羊和兔抗血清进行亲和层析纯化,获得抗体.以纯化后的羊抗体作为包被抗体,兔抗体作为显示抗体,建立新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测方法.结果 对羊进行4次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达1 536.对兔进行3次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达4 096.羊和兔抗体均可与新型冠状病毒S蛋白特异性结合.应用纯化后的抗体,成功建立了检测抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法线性良好,R2＞0.99,可用于新型冠状病毒灭活疫苗原液抗原含量的检测.结论 成功制备了羊和兔抗新型冠状病毒S蛋白高效价抗体,并初步建立了新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法.

关键词：新型冠状病毒、抗血清效价、酶联免疫吸附试验、抗原含量

所属期刊栏目：34

分类号：R183.3;R392-3(流行病学与防疫)

资助基金：北京市自然科学基金L192009

在线出版日期：2021-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：857-861