多重PCR法用于脑膜炎奈瑟菌血清群分群鉴定的适用性

摘要：

目的 应用多重PCR法鉴定脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)A、B、C、W135、Y 5个血清群,验证在基因水平鉴定疫苗用菌种血清群的适用性,并与实验室经典细菌培养法和血清凝集试验进行比对.方法 提取标准Nm血清群A、B、C、W135、Y的基因组DNA,针对5个血清群Nm荚膜多糖合成基因上的特异序列,应用多重PCR方法对目的片段进行扩增,根据PCR扩增产物的碱基片段大小不同区分这5个血清群;采用PCR方法鉴定7株Nm分离菌种的血清群;并与实验室传统细菌培养法和血清玻片凝集试验比对.结果 多重PCR方法能够鉴定Nm,并同时完成血清分群鉴定.该方法特异性和灵敏度(最低检测限为基因组DNA 0.1 ng)均较高.7株Nm分离菌种PCR检测结果与实验室经典培养法和血清玻片凝集试验结果一致,其中1株为血清群A群,1株B群,2株C群,1株W135群,2株Y群.结论 多重PCR方法对Nm检测的特异性和灵敏度均优于传统细菌培养法和血清玻片凝集试验,可同时检测Nm菌种的种特异基因和群特异基因,提高了分群鉴定的准确性.此外,试验结果客观,且可长期保存和追溯性查询,有利于疫苗用菌种的质量控制.

关键词：多重PCR、脑膜炎奈瑟菌、基因分群

所属期刊栏目：33

分类号：Q939.99(微生物学)

资助基金：兰州市2018年第四批科技计划项目十大科技创新项目2018-4-14

在线出版日期：2021-02-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1414-1420