单纯疱疹病毒2型UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

摘要：

目的 构建单纯痕疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 针对HSV-2 UL27、UL29基因,各筛选干扰效率最佳的shRNA片段相连接,构建双基因共表达慢病毒载体,并转染HEK293细胞作为干扰组,另设空白对照组(不做任何处理)和阴性对照组(转染不针对任何基因的慢病毒载体).转染48或24 h后接种HSV-2,RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中目的基因mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测各组细胞的存活率.结果 干扰组UL27和UL29基因mRNA的表达抑制率可达(78.61±2.14)％和(84.86±1.52)％,同时gB和ICP8蛋白的相对表达量明显下降(P均＜0.05),细胞的存活明显率提高(P均＜0.05).结论 构建的HSV-2 UL27、UL29双基因shRNA重组慢病毒表达载体能在HEK293细胞中表达,为后续HSV-2的基因治疗奠定了实验基础.

关键词：单纯疱疹病毒2型、UL27基因、UL29基因、慢病毒载体、短发夹RNA、HEK293细胞

所属期刊栏目：33

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：2018年广东高校省级重点平台和重大科研项目;广东省医学科学技术研究基金项目

在线出版日期：2021-02-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1381-1385