不同通气方式对抗破伤风毒素抗体工程细胞株生长及蛋白表达的影响

摘要：

目的 探讨生物反应器不同通气方式对抗破伤风毒素抗体的CHO工程细胞株生长、代谢及目的蛋白表达的影响.方法 在3个3L生物反应器中,分别选用微泡、大泡和膜供氧的通气方式,以相同的初始密度接种CHO种子细胞,设置相同的温度、pH、搅拌速度、溶氧(dissolved oxygen,DO)等关键培养参数,采用补料分批培养模式进行培养.每日取样,分别检测培养液的活细胞密度(viable cell density,VCD)、细胞活率、渗透压及葡萄糖、乳酸、NH4+和抗体蛋白浓度.筛选细胞生长较好及乳酸等代谢副产物累积较少且蛋白表达量高的一种通气方式.结果 微泡通气方式下,CHO细胞生长缓慢,最高VCD为7.63×106个/mL,接种后细胞活率一直低于90％且下降较快,培养8d,抗体蛋白浓度为76 mg/L.大泡通气方式下,最高VCD为12.45×106个/mL,培养1～6 d细胞活率均高于90％,培养第8天乳酸浓度开始下降,培养10 d,抗体蛋白浓度为534 mg/L.膜供氧通气方式下,最高VCD为13.54×106个/mL,培养1～8d细胞活率均高于90％,培养第8天乳酸浓度开始下降,培养10d,抗体蛋白浓度为755 mg/L.结论 大泡及膜供氧通气方式下细胞生长和蛋白表达情况均较好,选取易进行工艺放大的大泡通气方式进行后续培养工艺的建立.

关键词：细胞培养、通气方式、抗破伤风毒素抗体、CHO细胞株、细胞代谢、蛋白表达

所属期刊栏目：33

分类号：Q813.1+1(生物工程学(生物技术))

资助基金：兰州市科技重大专项2017-2-1

在线出版日期：2020-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1235-1239