不同灭活剂对柯萨奇病毒A组16型免疫原性的影响
目的 评价甲醛及β-丙内酯对纯化柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)灭活效果及免疫原性的影响.方法 将制备的CV-A16-168病毒液经浓缩、纯化后,用不同浓度甲醛(1∶400、1∶2000、1∶4000、1∶8000)及β-丙内酯(1∶1000、1∶2000、1∶3000、1∶4000)灭活,CV-A16抗原ELISA检测试剂盒检测抗原含量,确定最适灭活浓度.用1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯灭活CV-A16-168,按抗原含量分别制备为640和320 U/mL,加入A1 (OH)3佐剂,制备灭活CV-A16-168实验疫苗,免疫BALB/c小鼠2次,间隔28 d,于首次免疫后28、35 d采血分离血清,采用体外微量中和试验检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞术检测血清细胞因子水平.将甲醛灭活和β-丙内酯灭活实验疫苗分别腹腔注射5只BALB/c雌鼠和雄鼠2次,间隔28 d,初免后7d,雌雄小鼠合笼,怀孕后取出单独饲养,待乳鼠出生48 h内,分别用CV-A16-G10株(原型株,A基因型)、CV-A16-154株(B基因型)及CV-A16-G20株(B基因型)进行1000 LD50的病毒株颅内注射,观察21 d乳鼠的临床症状及生存情况.结果 1∶4000甲醛37℃3d及1∶2000β-丙内酯4℃24 h均可完全灭活CV-A16-168.小鼠经灭活CV-A16-168实验疫苗免疫后,血清中和抗体阳转率均达到100％,甲醛灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶7 131.55和1∶5 042.77,平均增长42.2和45.3倍;β-丙内酯灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶10 085.54和1∶6 208.38,平均增长42.2和48.5倍;不同灭活剂处理的相同抗原含量间抗体GMT差异无统计学意义(P均＞0.05),但组内二次免疫间的抗体GMT差异有统计学意义(P＜0.001);甲醛和β-丙内酯灭活实验疫苗免疫小鼠后均诱导产生IFNγ,抗原含量640与320 U/mL组比较,有显著升高(P＜0.001).乳鼠经CV-A16不同基因型毒株攻毒,观察21 d后,全部存活,母传抗体可对不同基因型毒株颅内注射攻毒的乳鼠产生100％的保护.结论 1∶4000甲醛及1∶2 000β-丙内酯均可完全灭活CV-A16,灭活后的免疫原性无显著差异,为CV-A16灭活疫苗的开发及研究奠定了基础.
柯萨奇病毒A组16型、甲醛、β-丙内酯、灭活、免疫原性
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R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
云南省科技厅重点新产品研发计划2015BC008
2020-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1217-1222,1229
