表达长效重组人生长激素-Fc融合蛋白的CHO细胞培养工艺的优化及放大

摘要：

目的 优化表达长效重组人生长激素-Fc(recombiant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白的CHO细胞培养工艺,并进行初步工艺放大.方法 采用7L生物反应器培养表达rhGH-Fc融合蛋白的CHO细胞,操作参数:转速200 r/min,温度37℃,pH7.2±0.1,溶氧值(DO)40％.通过改变对数增长期的pH(7.2±0.1降至6.9+0.1)及平台期降温幅度(37℃降至30及33℃),检测培养过程中细胞密度、细胞活率、培养液渗透压、葡萄糖及乳酸水平、以蛋白表达量为指标,优化7L生物反应器培养工艺.应用优化的最佳工艺进行14 L线性放大,通气量分别设置为0.5、0.1及0.03 SLPM,检测蛋白表达量.结果 7L生物反应器培养工艺最佳pH为6.9±0.1,最佳温度为33℃,该工艺下蛋白表达量高达1200 mg/L;14 L生物反应器培养工艺最佳通气量为0.03 SLPM,该工艺下蛋白表达量为880 mg/L.结论 成功优化了表达rhGH-Fc融合蛋白的CHO细胞7L生物反应器的培养工艺,并实现了14 L生物反应器的放大,本实验为后续rhGH-Fc融合蛋白的大规模生产奠定了基础.

关键词：重组人生长激素、Fc融合蛋白、CHO细胞、生物反应器

所属期刊栏目：33

分类号：R977.1(药品)

资助基金：吉林省科学技术厅医药办20160204034YY

在线出版日期：2020-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1165-1169