结核分枝杆菌蛋白Rv1872c的表达、纯化及其生物信息学分析

摘要：

目的 异源表达并纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)H37Rv的Rv1872c蛋白,探讨抗Mtb药物新型靶点.方法 PCR扩增Rv1872c编码基因,构建融合表达载体pET-Rv 1872c,并转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)中,加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达.用Co2+亲和层析纯化Rv 1872c融合蛋白,并对其进行生物信息学分析.结果 经SDS-PAGE和Western blot分析,证明Rv1872c融合蛋白在E.coli中完全以包涵体形式表达,其亚基相对分子质量约46200,且在变性条件下,经亲和层析获得高纯度的Rv1872c融合蛋白.生物信息学分析表明,Rv 1872c为不稳定的碱性蛋白,主要二级结构元件为α-螺旋和无规则卷曲,无跨膜区,推测为外周膜蛋白,且为潜在的醌依赖型L-乳酸脱氢酶.结论 通过原核表达和亲和层析,成功获得了高纯度的Rv1872c融合蛋白,为进一步功能鉴定和开发抗Mtb药物新型靶点提供了参考.

关键词：结核分枝杆菌H37Rv、Rv1872c蛋白、原核表达、亲和层析、生物信息学

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分类号：Q811.4;R378.91(生物工程学(生物技术))

资助基金：安徽省教育厅重点项目;蚌埠医学院科技发展基金项目;国家级大学生创新训练项目

在线出版日期：2020-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1117-1121,1127