结核分枝杆菌潜伏期抗原Rv3044的原核表达及其免疫原性

摘要：

目的 表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)潜伏期特异抗原Rv3044,并检测其能否被结核(tuberculosis,TB)感染者外周血T细胞识别,及其在小鼠模型中的免疫原性.方法 以分子克隆技术构建质粒pET28a-Rv3044,IPTG诱导表达、亲和层析纯化rRv3044蛋白,Western blot法进行鉴定;全血IFNγ分析试验(whole blood IFNγanalysis test,WBIA)检测其是否被TB感染者识别;联合融合佐剂DMT免疫C57BL/6小鼠,检测特异性CD4+Th1型应答和体液免疫应答水平.结果 构建的重组表达质粒pET28a-Rv3044经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达及纯化的rRv3044蛋白相对分子质量均为38 600.rRv3044刺激的TB感染者,尤其TB潜伏感染(latent TB infection,LTBI)者,外周血T细胞分泌的IFNγ水平均显著高于健康对照者(P＜0.05);BCG+ rRv044/DMT组诱导小鼠产生显著高水平的IgG抗体及其亚类,趋向于Th1型免疫应答,同时诱导小鼠脾细胞分泌高水平的特异性IFNγ和TNF-α.结论 rRv3044可被TB感染者T细胞识别,具有较强的免疫原性,为具有潜力的TB候选疫苗靶抗原,可用于TB感染尤其是潜伏感染的预防及诊断.

关键词：结核分枝杆菌、Rv3044、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：33

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：安徽省高校自然科学研究重点项目;长治医学院科研启动基金项目

在线出版日期：2020-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：748-753,761