长效重组人生长激素-Fc融合蛋白纯化工艺的建立

摘要：

目的 建立长效重组人生长激素-Fc(recombiant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白的纯化工艺.方法 rhGH-Fc融合蛋白细胞培养液经离心、低pH处理、过滤、浓缩预处理后,再经Protein-A亲和层析、CM阳离子交换层析、Q HP阴离子交换层析进行纯化,同时检测rhGH-Fc融合蛋白的蛋白含量、纯度、等电点及宿主蛋白、宿主DNA、Protein-A残留量等指标.结果 Protein-A亲和层析、CM阳离子交换层析、Q HP阴离子交换层析纯化产物的蛋白含量分别为145、132、92.4 mg,纯度分别为95.40％、95.90％和99.19％,宿主蛋白残留量分别为2 500、864和71 ng/mg,宿主DNA残留量分别为329、0.56和0.12 ng/mg,Protein-A残留量分别为24.5、3.2和0 ng/mg.rhGH-Fc 融合蛋白相对分子质量约97 300,等电点范围为5.5～6.5,可与鼠抗人生长激素(human growth hormone,hGH)抗体发生特异性结合.结论 成功建立了rhGH-Fc融合蛋白的纯化工艺,该工艺的纯化产物回收率及纯度均较高,本实验为rhGH-Fc融合蛋白的大规模生产奠定了理论基础.

关键词：重组人生长激素、抗体Fc段、融合蛋白、纯化、质量检定

所属期刊栏目：33

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省重点科技攻关项目20160204034YY

在线出版日期：2020-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：705-708,713