基于高通量测序的冷应激大鼠肝脏mRNA差异表达分析
目的 高通量测序技术分析冷应激大鼠肝脏基因mRNA差异表达.方法 将SPF级大鼠随机分为冷刺激组[(4±0.05)℃]及常温对照组[(24±0.05)℃],刺激24 h.采集2组大鼠肝脏组织并提取总RNA,应用Ⅲumina HiSeg平台测序,对筛选的差异表达基因进行基因功能(Gene Ontology,GO)注释及信号通路数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,采用qRT-PCR验证随机筛选的基因mRNA表达水平.结果 经测序分析,冷刺激组发掘新基因293个,其中244个有功能注释,差异表达基因98个;经GO分析,差异表达基因显著富集细胞过程、生物调控、代谢过程、细胞组分、细胞器、蛋白质运输等过程;经KEGG分析,大多数差异表达基因注释在原发性免疫缺陷、癌症形成过程、用于IgA生成的肠道免疫网络、细胞因子与细胞因子受体相互作用等通路,在MAPK、PI3K-Akt信号通路和内质网蛋白加工通路中表达量极高,在乙型肝炎和病毒感染通路表达量较低.与常温对照组比较,冷刺激组大鼠肝脏的多配体聚糖4(syndecan 4,Sdc4)及白蛋白(albumin,Alb)基因表达水平上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功筛选冷应激大鼠肝脏差异表达基因,该类基因很可能参与了机体代谢及损伤修复等过程,为深入研究大鼠冷应激机制积累了数据.
高通量测序、冷应激、大鼠肝脏、mRNA、差异表达基因
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Q7(分子生物学)
中国博士后科学基金;黑龙江省自然科学基金资助项目;黑龙江八一农垦大学博士科研启动基金;黑龙江八一农垦大学三横三纵项目
2020-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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