NOD样受体家族3炎性体对氧化三甲胺诱导的大鼠心肌细胞焦亡的调控作用
目的 探讨NOD样受体家族3(NOD-like receptor family 3,NLRP3)炎性体对氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)诱导的大鼠心肌细胞H9c2(2-1)焦亡(pyroptosis)的调控作用.方法 将H9c2(2-1)细胞分别经不同浓度TMAO处理不同时间,CCK-8法检测细胞存活率,确定最适TMAO处理浓度.在此浓度条件下,TMAO分别处理H9c2(2-1)细胞24、48及72 h,同时设对照组(未经TMAO处理的细胞),采用RT-PCR及Western blot检测H9c2(2-1)细胞中NLRP3、白细胞介素-1β(IL-1β)及胱天蛋白酶-1(Caspase-1) mRNA转录和蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞焦亡并确定焦亡时间点.于TMAO组及对照组中加入NLRP3抑制剂MCC950,处理H9c2(2-1)细胞至焦亡时间点,采用同样方法检测相关指标的变化情况,以验证TMAO的促炎作用及NLRP3炎性因子对TMAO诱导的H9c2(2-1)细胞焦亡的调控作用.结果 与对照组比较,300 μmol/L TMAO处理H9c2(2-1)细胞后,24、48及72 h细胞存活率差异无统计学意义(P＞0.05);48 h开始焦亡细胞数显著增加(P＜0.05),细胞中NLRP3、IL-1β及Caspase-1 mRNA转录和蛋白表达水平均显著升高(P均＜0.05).加入MCC950 48 h,经TMAO处理的H9c2(2-1)细胞焦亡显著减少(P＜0.05),NLRP3、IL-1β及Caspase-1 mRNA转录和蛋白表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 TMAO处理的H9c2(2-1)细胞促进了NLRP3炎性体的激活,出现炎症反应,导致H9c2(2-1)细胞焦亡,而抑制NLRP3可减轻TMAO诱导的炎症反应,减少H9c2(2-1)细胞焦亡.
NOD样受体家族3炎性体、细胞焦亡、氧化三甲胺、NLRP3抑制剂MCC950、大鼠心肌细胞H9c2(2-1)
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金面上项目81273568
2020-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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