脊髓灰质炎病毒Ⅲ型Sabin株C抗原和D抗原的分离及特性分析
目的 分离脊髓灰质炎病毒Ⅲ型Sabin株(sPVⅢ)C抗原和D抗原,并分析其部分特性.方法 采用CsCl密度梯度离心法分离sPVⅢ的C抗原和D抗原,电镜观察病毒形态;SDS-PAGE检测病毒结构蛋白组成;微量BCA法检测蛋白浓度,计算每种抗原所占比例;细胞病变法检测病毒滴度.同时检测上样浓度及超离次数对C抗原纯度的影响.结果 sPVⅢC抗原和D抗原在透射电镜下均呈球形,C抗原病毒颗粒密度较小,外壳大多较为松散,D抗原病毒颗粒密度较大,结构更稳固;C抗原由VP0、VP1、VP3蛋白组成,D抗原由VP1、VP2、VP3和VP4蛋白组成;C抗原和D抗原分别约占总蛋白含量的10%和90%,部分C抗原在分离前及分离过程中易产生聚集;D抗原的病毒滴度高于C抗原.降低上样浓度及进行二次超离可提高C抗原纯度.结论 采用CsCl密度梯度离心法成功分离了sPVⅢ的C抗原和D抗原,C抗原滴度远低于D抗原,且部分易产生聚集,较难达到较高纯度.
脊髓灰质炎病毒、Sabin株、C抗原、D抗原、分离
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R373.2+2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2018国家重大新药创制课题2018ZX09737003-005
2020-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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