19F型肺炎链球菌菌种的复壮及其荚膜多糖纯化工艺的优化

摘要：

目的 开发复壮肺炎链球菌19F型(Sreptococcus pneumoniae serotype 19F,简称PN19F)菌种的方法,并优化其荚膜多糖的纯化工艺.方法 配制PN19F菌种用液体扩增培养基和固体选择培养基,筛选出荚膜较厚的单菌落,比较复壮前后PN19F菌种的发酵培养情况、纯化后多糖收获量及多糖质量;将发酵液裂解后分别酸沉淀8、24和48 h,并经100 KD超滤纯化,再分别用乙醇法和冻干法制备精制多糖,比较其多糖收获量、组分检定结果、抗原活性、核磁共振图谱.结果 两种培养基复壮前后的PNI9F菌种,发酵收获菌液A600值及培养时间变化不大.纯化后多糖收获量分别为0.2和0.6 g/L,即复壮后多糖收率提高了195％.酸沉淀8、24h后纯化的多糖质量合格,且24 h较8h多糖收率高约38％,酸沉淀时间达48 h时,产率无明显变化,但多糖质量不合格.乙醇法和冻干法制备的精制多糖各项指标均合格,且无明显差异.结论 应用制备的两种培养基复壮的PN19F菌种,可明显提高荚膜多糖产量.PN19F菌种的酸沉淀时间不超过24 h,乙醇法和冻干法均可用于精制多糖制备.

关键词：肺炎链球菌、复壮、荚膜多糖、纯化

所属期刊栏目：33

分类号：R378.1+4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：316-320,333