α-肿瘤坏死因子吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立及验证
目的 建立检测Q-肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)的吖啶酯化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)方法并进行验证.方法 采用全自动化学发光分析仪,用吖啶酯标记TNF-α多克隆抗体,生物素标记TNF-α单克隆抗体,链霉亲和素包被磁颗粒,利用磁颗粒-链霉亲和素-生物素系统实现固相和液相的分离,建立检测TNF-α的吖啶酯CLIA方法;验证方法的检测限、线性范围、准确性、精密度及特异性,用优化后的方法检测150份健康血清样本确定正常参考值范围.应用该方法与西门子immulite1000试剂盒平行测定75份TNF-α血清样本.结果 吖啶酯CLIA方法反应条件为加入50 μL样本,用PBS-1％ BSA稀释校准品,加入1∶2000稀释生物素及吖啶酯标记抗体.该方法最低检测限为0.245～0.519 pg/mL,样本在5～1 000 pg/mL范围r均大于0.990 0;TNF-α质控品回收率为92.6％～ 104.9％,3种浓度质控品批内CV ＜5％,总CV＜ 10％;对溶血、脂血、类风湿因子及常见肿瘤药等干扰率均小于10％;系统检测值可溯源至国际标准品.150份健康血清样本正常参考值范围确定为＜10 pg/mL.该方法与西门子TNF-α蛋白检测试剂盒相关系数r=0.989 0;检测值之间差异呈现随机化,无系统误差.结论 成功建立了优化检测TNF-α的吖啶酯CLIA方法,该方法精密度高、线性范围广、特异性强、检测结果准确性好,适合临床推广使用.
α-肿瘤坏死因子、吖啶酯、化学发光免疫分析
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R730.3(肿瘤学)
国家科技支撑计划2015BAK45B01
2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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