金黄色葡萄球菌金属磷酸酶的遗传特征分析及功能鉴定

摘要：

目的 对金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)一种新型金属磷酸酶(metallophosphatase,MPP)SA1662进行遗传特征分析及生物学功能鉴定.方法 从金葡菌基因组DNA中克隆SA1662基因,通过序列比对和构建进化树分析其遗传特征;构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经Ni柱纯化后,测定酶活性.应用同源重组技术构建SA1662基因缺失株,分析SA 1662基因缺失对金葡菌生长、万古霉素敏感性、细菌自溶性和细菌生物菌膜形成的影响,探讨SA1662的生物学功能.结果 SA1662蛋白具有MPP类蛋白结构域,并含有特征性金属离子结合位点,与金葡菌和施维茨葡萄球菌中相关蛋白有更近的亲缘关系.该蛋白酶活性依赖于Mg2+和Mn2+,特别是Mg2+.与野生型菌株相比,SA1662基因缺失后,细菌生长速度减慢,万古霉素敏感性、TritonX-100诱导下的细菌自溶性和细菌生物菌膜形成能力均下降.结论 SA1662蛋白为一种新型的金葡菌MPP,在细菌抗逆性中起着重要作用.

关键词：金黄色葡萄球菌、金属磷酸酶、遗传特征、生物学功能

所属期刊栏目：33

分类号：Q936(微生物学)

资助基金：博士后研究人员落户黑龙江科研启动项目;黑龙江八一农垦大学引进人才博士科研启动项目;黑龙江八一农垦大学培育课题重点项目

在线出版日期：2020-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：136-143