表达呼吸道合胞病毒F蛋白的新城疫重组病毒的构建及其免疫原性
目的 利用新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)反向遗传系统构建表达呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F蛋白的重组病毒,并以BALB/c小鼠为动物模型,评价其免疫原性.方法 在已建立的NDV 反向遗传系统的基础上,将RSV F基因插入NDV全长cDNA克隆中,构建并拯救获得表达RSV F蛋白的重组病毒rLS/RSV-F.采用间接免疫荧光(indirect immunoinfhscent assay,IFA)法鉴定RSV F蛋白的表达;以HA、病毒半数鸡胚感染量(50% infective dose,EID50)、半数组织感染量(50% tissue infectious dose,TCID50)及生长曲线等生物学指标对其生物学特性进行鉴定;将rLS/RSV-F滴鼻免疫BALB/c小鼠,于免疫后第49天经眼眶后静脉丛采血,分离血清,ELISA法检测IgG抗体效价,中和试验检测中和抗体效价.结果 成功拯救表达RSV F蛋白的NDV重组病毒rLS/RSV-F,具有与亲本病毒相似的感染能力及生长动力学特性;rLS/RSV-F可刺激小鼠机体产生较高水平的针对RSV F蛋白的特异抗体及RSV中和抗体,与亲本病毒对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 成功拯救了表达RSV F蛋白的NDV重组病毒,并通过动物实验证明重组病毒rLS/RSV-F具有较好的免疫原性,为RSV疫苗的研发提供了新思路.
呼吸道合胞病毒、新城疫病毒、反向遗传系统、基因表达、免疫原性
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R183.3(流行病学与防疫)
北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目;北京市疾病预防控制中心、北京市预防医学研究中心科研培育专项
2020-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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