微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒的效果
目的 探讨利用生物反应器微载体无血清培养水痘.带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的效果.方法 利用生物反应器,将人二倍体细胞2BS培养至在微载体上形成单层后,分别采用BD008无血清培养基及含有2％新生牛血清的MEM维持液按MOI为0.004～0.008感染VZV毒种;当细胞呈现70％细胞病变效应(cytopatho-genic effect,CPE)时,无血清培养的细胞沉淀经PBS洗涤1次,含血清培养基培养的细胞洗涤1～3次后收获,分别制备3批VZV原液;噬斑法检测病毒滴度,ELSIA法检测牛血清白蛋白残留量,并对制备的水痘减毒活疫苗(live attenuated varicella vaccine,Varv)进行热稳定性检测.结果 洗涤1～3次获得的3批含血清培养VZV原液滴度从5.00 lgPFU/mL降至4.12 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为203.2、120.3和81.2 ng/mL,前2批超出合格范围(≤100 ng/mL).洗涤1次获得的3批无血清培养VZV原液滴度分别为4.92、5.00和5.30 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为75.2、82.3和71.9 ng/mL,均值低于洗涤1及2次含血清培养VZV原液(P＜0.05).3批无血清培养的VarV热稳定性均符合要求.结论 获得的无血清培养的VZV原液滴度及牛血清白蛋白残留量均符合《中国药典》三部(2015版)标准,本研究为提高VarV质量及生物反应器微载体工艺改进提供了参考.
微载体、2BS细胞、无血清培养基、水痘-带状疱疹病毒、病毒滴度、牛血清白蛋白残余量
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R752.1+2(皮肤病学与性病学)
2020-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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1425-1427,1432
