过氧化氢酶活性检测罗丹明B褪色光度法的建立

摘要：

目的 建立检测过氧化氢酶活力的罗丹明B褪色光度法.方法 在硫酸介质中,加入过氧化氢氧化罗丹明B褪色,再加入Fe3+加速反应进程,根据酶促反应前后吸光度变化值△A确定过氧化氢酶活性.对建立的方法中的罗丹明B褪色反应条件(褪色反应催化剂、罗丹明B用量、褪色反应时间、褪色反应温度、硫酸用量)及酶促反应条件(过氧化氢体积、酶促反应时间)进行优化;确定该方法的线性范围;加入浓度小于过氧化氢基底液l/2的共存还原性物质(葡萄糖、果糖、乳糖、半乳糖)进行干扰试验.用建立的方法检测鱼肝脏中过氧化氢酶活性.结果 以1 mL Fe3+作为催化剂,5 mL罗丹明B作为底液时,体系吸光度控制在0.8以内;在2 mmol/L硫酸介质中,40℃条件下反应60 min,罗丹明B褪色程度趋于最大;取过氧化氢基质液1.00 mL,在15 min内,酶促反应达到完全.在最佳条件下,过氧化氢酶活性在0.02～0.3 U/mL范围内与△A具有良好的线性关系,r=0.999 2,检测限为0.011 U/mL.建立的方法可检测鱼肝脏中过氧化氢酶活性.结论 建立的罗丹明B褪色光度法具有较好的选择性和较高的灵敏度,仪器设备简单,操作简便,适用于生物样品微量过氧化氢酶活性分析.

关键词：过氧化氢、过氧化氢酶、罗丹明B、褪色光度法

所属期刊栏目：32

分类号：O657.3(分析化学)

资助基金：甘肃省高等学校科研项目;甘肃省高等学校创新能力提升项目资助

在线出版日期：2020-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1390-1394